摘要
本发明提供一种蛋白检测方法及检测制剂,通过介孔二氧化硅‑氧化石墨烯复合纳米多孔材料实现目标蛋白的高效富集,结合靶向抗体修饰的磁性纳米颗粒完成特异性免疫捕获,并利用三维水凝胶抗体阵列的微流控芯片实现单分子分离。信号放大采用酶标二抗‑金纳米棒偶联物,通过等离子体共振效应增强荧光信号,结合卷积神经网络算法校正背景噪声,显著提升检测可靠性;实验表明,该方法检测限低至0.12pg/mL,线性范围覆盖0.5‑100,000pg/mL,单细胞检测误差±7.8%,批次重复性(CV=4.2%),非特异性吸附率仅1.1%,检测时间缩短至1.2小时。本发明检测方法适用于肿瘤标志物的超灵敏检测,尤其在CTCs原位分析中具有临床应用潜力。