摘要
本发明属于生物技术领域，涉及一种靶向HER2的鲨鱼纳米抗体(VNAR)的制备方法及其应用。所述鲨鱼纳米抗体命名为VNAR‑G4，其氨基酸序列如SEQ ID No.10所示。VNAR‑G4分子量约为15kDa，远小于传统单克隆抗体(～150kDa)；具有延伸的CDR3环结构，可特异性结合HER2的隐藏表位(如二聚化界面)，克服传统抗体的表位识别局限；在极端pH条件下仍能保持结构完整性和结合活性，适用于严苛体内环境；经实验验证，与HER2抗原具有高亲和力(KD≤nM级)及强特异性，无交叉反应；采用大肠杆菌原核表达系统实现可溶性表达，工艺简单、成本低且易于规模化生产；支持灵活基因工程改造(如构建双特异性抗体或药物偶联物)；VNAR‑G4能有效抑制HER2信号通路活性，在体外及动物模型中显著抑制HER2阳性肿瘤细胞增殖；为治疗乳腺癌、胃癌等HER2驱动型恶性肿瘤提供了新型靶向治疗工具。
