摘要
本发明提供一种牛原代心肌成纤维细胞低氧模型构建方法,属于细胞模型构建技术领域,采用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶依次消化、差速贴壁等获得牛原代心肌成纤维细胞,以3.5×105‑8×105/ml的接种细胞密度,在1%O2、5%CO2、和94%N2的低氧条件下处理24‑72h,构建细胞低氧模型。本发明基于原代牛心肌成纤维细胞的三气培养箱低氧模型,可精确模拟病理低氧环境,适用于低氧应激机制研究及关键分子筛选。该模型生理相关性高、操作简便,具有广泛适用性和参考价值,为牛低氧性心肌疾病研究提供了可靠实验平台。