一种灯盏细辛查尔酮合酶活性和/或选择性增强的突变体及其筛选方法与应用
申请号:CN202510947389
申请日期:2025-07-10
公开号:CN120442755B
公开日期:2025-09-16
类型:发明专利
摘要
本发明公开一种灯盏细辛查尔酮合酶活性和/或选择性增强的突变体及其筛选方法与应用。本发明构建以p‑香豆酸为底物合成根皮素的重组质粒,通过结构预测和催化机制,筛选出与EbCHS催化活性和选择性相关的位点,再实验筛选得到有效突变体和有效突变位点;将EbCHS与不同CHS序列比对,筛选实验,得到与前述有效突变位点邻近的非保守氨基酸位点的有效突变体;将得到的两种有效突变体进行两两组合,得到相关检测信息;依据前述实验信息建库以及机器学习建模预测,实验验证,获得在根皮素合成途径中活性和选择性显著增强的EbCHS,能以p‑香豆酸为底物高效合成根皮素,且降低副产物,为促进根皮素的工业化生产提供了技术支持。
技术关键词
灯盏细辛
突变体
筛选方法
酿酒酵母
位点
启动子
副产物
质粒
尿嘧啶
培养基
XGBoost模型
编码
序列
发酵液
底盘
琼脂
核苷酸
融合基因
机制