一种基于数字PCR的病媒生物核酸定量检测方法

本发明公开了一种基于数字PCR的病媒生物核酸定量检测方法,属于病媒生物检测技术领域,本发明中，通过多维度优化显著提升了病媒生物核酸检测的综合性能。在引物浓度调节环节，采用荧光信号反馈机制实现动态平衡，通过预扩增阶段的实时信号监测精准捕捉各靶标扩增差异，依据信号偏差程度阶梯式调整引物浓度，使高丰度靶标引物浓度降低以避免资源抢占，低丰度靶标引物浓度提升以增强扩增动力。同时引入序列同源性分析，对同源性较高的引物组合实施协同调节，既避免单纯提升浓度导致的非特异性扩增，又通过交叉调整减少引物间竞争抑制，使多靶标在同一反应体系中达到扩增效率的动态平衡，有效解决了传统多重PCR中常见的扩增偏倚问题。