一种基于荧光闪烁指纹智能识别的β-分泌酶活性检测方法

本发明涉及一种单分子肽识别与酶活性检测方法，具体为基于荧光闪烁指纹与深度学习识别的β‑分泌酶活性检测方法。所述方法通过将自发闪烁型荧光染料标记于特定肽底物，并利用点击化学将其固定于功能化玻片表面，实现单个肽分子的稳定锚定；随后，采用全内反射荧光显微镜采集其时间序列荧光轨迹，获得酶切前后状态下的单分子闪烁指纹。结合深度学习模型对轨迹数据进行分类分析，可准确判断肽分子是否发生酶切，进而实现酶活性的定量检测。相较于传统方法，本发明在检测灵敏度、特异性及对复杂样本的适应性方面具有显著提升。以β‑分泌酶为模型，验证准确率超过88％，为酶活性分析与相关疾病早期诊断提供了新的技术路径，具有广阔的应用前景。