摘要
本发明公开了一种单细胞九蛋白高通量定量检测装置及方法,属于单细胞分析技术领域。方法通过多激光耦合光路生成三个独立可调的光斑,利用扩束镜、反射镜及扫描透镜调节光斑尺寸与位置,结合平行光束截取和长工作距离物镜构建三维匀强光场,实现单细胞不同分布位置蛋白的均匀激发与检测。通过体积等效标定原理,将荧光信号强度与抗体分子数关联,消除蛋白分布位置对检测的影响。装置包括信号调制模块、光斑定位与匀强光场模块、信号采集处理模块,其中匀强光场激发光强变异系数低于1.3%,检测光变异系数为1.9%,九种荧光通道检测限达10‑10000个分子。本发明解决了多激光串扰问题,支持单细胞九种蛋白同步定量,满足临床白血病分型的高通量检测需求。