摘要
本发明涉及生物制药技术领域,公开了一种高纯度和高活性血管性血友病因子的制备工艺,包括以下步骤:S1新鲜血浆梯度离心处理,选取新鲜血浆进行离心处理,收集富含血管性血友病因子的次级上清液、S2特异性免疫亲和层析初步分离,收集的次级上清液通过偶联抗血管性血友病因子抗体的免疫亲和层析柱、S3温和洗脱与超滤浓缩、S4凝胶过滤层析二次精纯、S5保护剂添加与制剂成型。本发明通过离心参数自适应优化算法,结合蛋白质浓度与浊度动态调整第二次离心的转速和时间,减少杂蛋白沉淀,提升次级上清液中vWF相对含量15%~20%,再经特异性单克隆抗体亲和层析与凝胶过滤层析的双级纯化,使vWF纯度稳定在98.2%~98.6%,批间差异≤2.4%,显著优于传统工艺。