一种Alport综合征小鼠NMD逃逸模型的构建方法及其应用
申请号:CN202511261926
申请日期:2025-09-05
公开号:CN120731923B
公开日期:2025-11-04
类型:发明专利
摘要
本发明公开了一种Alport综合征小鼠NMD逃逸模型的构建方法及其应用,基于CRISPR/Cas9基因编辑技术制备携带Col4a5基因c.4432delG移码突变的非人类动物模型。该方法通过向小鼠受精卵共注射靶向Col4a5基因49号外显子的gRNA、含c.4432delG突变的同源重组供体寡核苷酸及Cas9核酸酶,经胚胎移植获得F0代突变小鼠;通过PCR结合测序验证突变位点,再经两代繁殖建立稳定遗传的突变系。经验证该模型符合Alport综合征的病理特征,可稳定模拟人类X连锁型Alport综合征的典型临床表现及病理特征,可作为Alport综合征研究的重要工具。
技术关键词
非人类动物模型
指标系统
Cas9核酸酶
寡核苷酸
Cas9基因
转录技术
逆转录
白蛋白
HE染色
编辑技术
肌酐
引物
小鼠模型
荧光
供体
位点
序列