摘要
本发明公开了一种人永生化输卵管成纤维细胞株及其构建方法和应用,属于细胞永生化构建技术领域。该发明首先通过酶消化法从人输卵管组织中分离、培养并纯化出成纤维细胞,并对其标志物进行鉴定,随后利用慢病毒载体将猿猴病毒40大T抗原基因导入原代成纤维细胞,并通过嘌呤霉素筛选获得稳定表达SV40T的细胞株,最终构建出可以稳定传代的人永生化输卵管成纤维细胞。该细胞株具有增殖能力强、遗传稳定性高的特点,且随着细胞代数增加,细胞未见明显衰老,说明成功建立了人永生化输卵管成纤维细胞系。本发明解决了原代成纤维细胞体外培养寿命有限的问题,为输卵管相关疾病、卵巢癌起源以及肿瘤微环境等领域的研究提供了可靠的体外细胞模型。