摘要
本发明公开了一种靶向创制快长罗非鱼新品系的方法,属于鱼类培育技术领域。具体包括以下步骤:(1)以pomc基因第三外显子上如SEQ ID NO.1所示的片段作为gRNA靶点序列;(2)设计合成gRNA引物序列;(3)采用gRNA引物序列和gRNA质粒扩增后经转录纯化获得gRNA片段;(4)通过基因编辑将gRNA片段转入罗非鱼的受精卵中,获得F0代阳性鱼;(5)将F0代阳性雄鱼与野生型雌鱼杂交,筛选出F1代亲鱼,再通过F1代亲鱼培育获得纯合缺失突变的F2代罗非鱼。本发明首次在尼罗罗非鱼中建立了pomc纯合敲除系,这种新的快长品系是一个完全的基因功能缺失模型,成本更低效率更高,且表型能够稳定遗传。