一种提升THP-1细胞HDR效率的基因编辑方法

本发明属于生物医药领域，具体公开了一种提升THP‑1细胞HDR效率的基因编辑方法，本发明通过选择THP‑1细胞作为目标细胞，设计针对特定基因位点的CRISPR/Cas9 gRNA，制备包含目标基因同源臂的α‑donor载体，并利用电穿孔转染技术将gRNA、Cas9蛋白和α‑donor载体导入THP‑1细胞。通过优化电穿孔转染条件和使用新型α‑donor载体，本发明显著提高了THP‑1细胞的存活率和HDR效率。此外，本发明还提供了一种用于提升THP‑1细胞HDR效率的试剂盒，包含所需的CRISPR/Cas9 gRNA、α‑donor载体、Cas9蛋白以及电穿孔转染所需的缓冲液和试剂。该方法为基因编辑在动物细胞模型构建、药物靶点筛查和基因功能研究中的应用提供了有力支持。